瘦肉精检测方法(瘦肉精检测怎么检测)

yuer512023-03-14 18:43:45胎教知识21

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请问有谁做过瘦肉精含量测定的实验,怎样测

瘦肉精”又称盐酸克仑特罗,是一种白色或类白色的结晶粉末,猪食用后在代谢过程中能够促进蛋白质合成,加速脂肪的转化和分解,提高猪肉的瘦肉率。

含有“瘦肉精”的猪肉如果被人食用后,临床表现会有如下症状:急性中毒会造成心悸,面颈、四肢肌肉颤动,手抖甚至不能站立,头晕、乏力;原有心律失常的患者更容易发生反应,如心动过速,室性早博,心电图示S-T段压低与T波倒置;原由交感神经功能亢进的患者,如有高血压、冠心病、甲状腺功能亢进者,上述症状更易发生;与糖皮质激素合用,可引起低血钾,从而导致心律失常。

如发生中毒情况需实施急救治疗:洗胃、输液,促使毒物排出;在心电图监测及电解质测定下,使用保护心脏药物如6-二磷酸果糖(FDP)及β1-受体阻滞剂倍他乐克

市民在购买猪肉过程中,如果发现猪肉肉色较深、肉质鲜艳,后臀肌肉饱满突出,脂肪非常薄,这种猪肉则可能使用过“瘦肉精”,尽量不要买. 瘦肉精的四种检测方法 1. 1 金标快速检测卡本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行尿液中克伦特罗分子的快速定性检测。样本中的瘦肉精在流动的过程中与胶体金标记的特异性的单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上瘦肉精—BSA偶联物的结合。将尿样收集在干净容器中,尿样可直接测定,肉样粉碎后用HCL溶液定容,超声提取过滤加NaOH再加磷酸二氢钠过滤后C1小柱卒取而得试样,取出试剂将试剂板置于平坦的台面上,用塑料管吸取尿样或试样,然后垂直滴加2~3滴尿样或试样于试剂板的加样孔内,测试结果在3~5min读取,当试剂板的测试区出现一条紫红色带则为阳性,出现两条紫红色则可判断为阴性。 1. 2 酶联免疫法(ELISA) 本方法的检测依据是抗原抗体反应,将克伦特罗特异性抗体吸附在固相载体表面,加入酶标克伦特罗结合物、标准溶液或者样液,游离的克伦特罗,酶标结合物与结合在固体表面的克伦特罗特异性抗体竞争,未结合的酶标克伦特罗结合物洗涤除去。加入酶底物,在结合酶的催化作用下,无色底物降解产生蓝色物质,加入终止剂后颜色转变为黄色。通过酶标检测仪,在450nm波长处测得吸收值。尿样可直接测定,肉样粉碎后用HCL溶液定容,超声提取过滤加NaOH再加磷酸二氢钠过滤后C18小柱卒取而得试样。用标准溶液或试样加入酶标板上相应微孔中,反应1h后洗涤4次,加入显色溶液15min后再加入终止液,然后在酶标仪上测定计算,总用时约3h。 1. 3 高效液相色谱法(HPLC) 组织如肉样剪碎后,用高氯酸溶液匀浆,进行超声加热提取后,用异丙醇加乙酸乙酯萃取,有机相浓缩,经弱阳离子交换柱进行分离,用乙醇+氨(98+2)溶液洗脱,洗脱液经浓缩,经流动相磷酸二氢钠+甲醇(65+35)定容后在高效液相色谱仪上进行测定,外标法定量计算出结果。总用时约4h。 1. 4 气相色谱-质谱法(GC-M S) 组织如肉样剪碎后,用高氯酸溶液匀浆,进行超声加热提取后,用异丙醇加乙酸乙酯萃取,有机相浓缩,经弱阳离子交换柱进行分离,用乙醇+氨(98+2)溶液洗脱,洗脱液经浓缩,经N,O-双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后于气质联用仪上进行测定,以美托络尔为内标定量计算出结果。样品处理过程与1. 3基本一样,总用时约4h。

瘦肉精检测问题

目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为 0.05μg/kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。 (1)试剂和材料 以下所有试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂;水为符合GB/T6682规定的二级水。 ①盐酸克伦特罗对照品:含盐酸克伦特罗不得少于98.5% ②盐酸 ③无水甲醇 ④氢氧化钠 ⑤磷酸二氢钾 ⑥磷酸 ⑦盐酸溶液 取盐酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾68g,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.O,用水稀释至1000ml,即得。 ⑨0.05mol几磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾6.88,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.0,用水稀释至1000mi,即得。 a.氢氧化钠溶液 取氢氧化钠48,加水使溶解成100mi,即得。 b.盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg/mi) 准确称取28.3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi储备液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)仪器和设备 ①酶联免疫反应读数仪 ②分析天平 精度0.00001g ③天平 精度0.01g ④冷冻离心机 ⑤50mi具塞离心管 ⑥匀浆机 ⑦微型振荡器 ⑧回旋振荡器 ⑨微量移液器 单道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩干热浓缩器 ①空气压缩机 (3)测定步骤 ①试料的制备(尿) 取供试尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为供试试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为空白试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿2ml,于3000r/min离心l0min,上清液1.0ml添加l00ug/L的克伦特罗对照溶液20/H。作为2ug/l空白添加试料,直接供酶联免疫测定法测定。 ②试料的制备(肝) 取约l00g新鲜或冷冻后融化的空白或供试猪肝,用匀浆机以10000r/rain匀浆1-2min,使均匀呈糊状,一20~C以下冰箱中贮存备用。 取均浆后的供试肝样,作为供试试料。 取均浆后的空白肝样,作为空白试料。 取均浆后的空白肝样(1土0.05)e添加l00ng/m1的克伦特罗对照溶液20tzL作为2ng/g空白添加试料。 a:提取(肝) 取(1士o.05)z试料,置50ml离心管中;加盐酸溶液5.0mi,旋涡混匀,中速振荡1.5h;在10-15~C下以4000r/mill以上速度离心15min;上清液移人另一50ml离心管中,加入氢氧化钠溶液300gL,混匀,振荡15min;加0.5mol/l磷酸二氢钾溶液4。0ml,混匀,2-8~C放置过夜;取上述溶液于10~15~C以4000r/111113以上的速度离心15min,上清液备用。 b.净化(肝) C,,固相萃取柱依次用无水甲醇3mi、0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2mi预洗,不使柱床干涸;将备用上清液全部过柱;用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2ml淋洗,挤干,弃去所有淋洗液;用无水甲醇2mi洗脱,流速控制在0.5ml/mm以下,挤干,收集洗脱液;于50~60~C下用氮气或空气缓缓吹干洗脱液;残余物用水1.0ml溶解,以4000r/mill以上的速度离心15rain,清液作为试样溶液供酶联免疫测定法测定。 ③测定 a.室温应控制在19~30~C。 b.取在19-30~C放置1-2h的试剂盒,按每个标准溶液和试样溶液至少两孔计算所需酶联板条的数量,插入框架。每个微孔加入用缓冲溶液100倍稀释的抗体100~tL,封口膜封板,室温孵育30min。 c倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体。用多道移液器加水250pL到酶联板的微?L内,稍后倒出孔内液体,再将酶联板倒置在吸水纸上拍打,如此重复操作洗板3次。 d.分别吸取标准溶液、空白试料、空白添加试料和供试试料各20uL,分别放入不同微孔底中央,并在每孔内加入用缓冲溶液100倍稀释的酶结合物100~I。,在微型振荡器上混匀,用封口膜封好,室温孵育30min。 e.倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体,重复洗板3次。 f.用多道移液器加入用底物缓冲溶液10倍稀释的底物100uL,室温避光孵育15min。 g.用多道移液器每孔加终止液100uL。 h.在1h内将酶联板放于酶标仪内,于450nm波长处测定吸光度值。 (4)计算 用数据分析软件对结果进行分析,绘出标准曲线,并得出试料中克伦特罗的含量。 (5)灵敏度和回收率 本方法的平均检测下限为0.1mg/Kg。 本方法在1ug/kg添加浓度水平上猪尿回收率范围为60%一120%,猪肝回收率范围为40%~120%。参考资料baidu/ baidu

现在瘦肉精的检测方法有哪些

有很多啊,胶体金快速检测卡跟酶联免疫试剂盒啊,还可以通过仪器设备检测,你可以看下下面这个检测卡

盐酸克伦特罗属于β-兴奋剂类药物,俗称瘦肉精,可提高胴体瘦肉率,曾被广泛添加于饲料中。人食用了含克伦特罗残留的动物性食品,会出现肌肉震颤、心悸、过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、颤栗等症状,世界各国已明文禁止其使用。常规仪器检测方法不能满足实际生产中大批量检测的需求。该快速检测卡具有方便、快速、灵敏等特点,适用于现场大批量样本筛选检测以及基层单位的执法监督使用。

盐酸克伦特罗快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,当样品溶液滴入样品孔后,样品溶液中的盐酸克伦特罗与金标抗体相结合,进而封闭金标抗体上盐酸克伦特罗的抗原结合点,阻止金标抗体与纤维素膜上盐酸克伦特罗偶联物结合,如果样品溶液中的盐酸克伦特罗含量大于检测限,使之检测线不显色,结果为阳性;反之,如果样品溶液盐酸克伦特罗含量小于检测限,则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的盐酸克伦特罗偶联物结合,从而显红色,结果为阴性。

瘦肉精检测方法有哪几种

(1)胶体金快速检测法将待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,待检物与金标试剂的结合物又与试纸条发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果,从而实现特异性免疫诊断。测试卡分析快速,仅需3~5分钟,无需专业人员操作,无需借助仪器,可以凭肉眼观察到结果,定性检测,测试卡可常温保存。

(2)酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其原理是利用抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将辣根过氧化物酶(HRP)与克仑特罗(CL)结合,形成酶偶联克仑特罗。将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克仑特罗抗体结合,然后加入待测克仑特罗和酶偶联克仑特罗,它们竞争性与克仑特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克仑特罗含量。若待测克仑特罗多,则被结合的酶偶联克仑特罗少,有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克仑特罗含量,比色法的最佳波长为450纳米。

如何检测"瘦肉精"猪肉?

答:消费者鉴别猪肉是否含有瘦肉精的最简单方法就是看该猪肉是否有脂肪油,如该猪肉在皮下就是瘦肉,则就存在含有瘦肉精的可能。

从外观上来看,含瘦肉精的猪肉颜色鲜红,肥肉和瘦肉有明显的分离,脊柱两侧的肉略有凹陷。中国生猪肉品种的瘦肉率大约在50%左右,如果整头猪瘦肉过多,就很值得怀疑。

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